革蘭氏染色是一種常用的細菌分類和鑒定方法,主要依據細菌細胞壁的結構差異進行區分。下面,我將簡要介紹如何使用
革蘭氏染色儀。
首先,準備所需材料:細菌培養物、革蘭氏染色試劑盒、顯微鏡等。
1.取一塊干凈的玻璃片,并在其上滴上一滴蒸餾水。
2.用無菌的鐵環取少量細菌培養物,并涂抹于玻璃片上。
3.將涂有細菌的玻璃片放于加熱架上,用火輕微加熱使其干燥。
4.在玻璃片上滴上革蘭氏染色試劑中的第一種染色液——紫色染色液,靜置30秒鐘。
5.用蒸餾水清洗干凈玻璃片,以去除多余的染色液。
6.在玻璃片上滴上革蘭氏染色試劑中的第二種染色液——碘液,靜置30秒鐘。
7.用蒸餾水清洗干凈玻璃片。
8.在玻璃片上滴上革蘭氏染色試劑中的第三種染色液——脫色液,直到玻璃片上沒有顏色流出為止。注意:過度脫色會導致革蘭氏陰性菌失去染色而呈現假陽性結果,因此應控制好脫色時間。
9.用蒸餾水清洗干凈玻璃片。
10.最后,在玻璃片上滴上革蘭氏染色試劑中的第四種染色液——紅色染色液,靜置30秒鐘。
11.用蒸餾水清洗干凈玻璃片,待其晾干即可使用顯微鏡觀察。
在顯微鏡下觀察時,革蘭氏陽性細菌呈紫色或暗紫色,而革蘭氏陰性細菌則呈淡紅色或粉色。通過觀察細菌染色后的顏色,可以初步鑒定其是否為革蘭氏陽性或陰性菌,進而進行細菌分類和鑒定工作。
總之,使用革蘭氏染色儀需要嚴格按照操作步驟進行,并注意控制染色時間和脫色時間,以確保得到準確的結果。